肉的宰后嫩化核心归因于肌原玻纤组成部分的破碎，肌原玻纤组成部分是由内源性球血清质酶溶解酶降解塑料塑料肌原玻纤和内部骨架球血清质酶导致的。与几十块年来一致是关注公众号原点的钙球血清质酶酶不同于，胱天球血清质酶酶（caspases）近期是感兴致语句题。胱天球血清质酶酶在内部凋亡的继续执行时段起着至关非常重要的发生反应，在这当中caspase-3在人死之后球血清质酶溶解中的发生反应是一定要多方位面和缜密的，那么什么值得进一歩探索。S-亚硝基化能够 调钙减少、专业能力分解、球血清质酶质降解塑料塑料和内部凋亡来调口感，比如嫩度和持水专业能力。后期探索感觉S-亚硝基化可不可以降低依赖关系的线粒体的caspase-3级联发生反应，这或者是背部肌肉内部凋亡和羊肉品质质量发生变化的问题。caspase-3的探索内容是其与内部凋亡的关系的，殊不知，没有有探索探究S-亚硝基化调caspase-3的机理。

2024年9月由沈阳农林业二本大学张万刚教援团队合作在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱微生物为该研究提供了亚硝基化突显组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文名称：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

杂志期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2028年不良影响指数公式：5.7

文章发表期限：2024年9月

企业标准：南京农业大学

理论研究装修材料：蛋白

拜谱可以提供工艺：亚硝基化修饰组学

技术水平路经：

一、理论研究数据

01.Caspase-3可溶性

现在尚不很明白NO对caspase-3的遏定制用有没归因于NO介导的S-亚硝基化，与众不同浓硫酸浓度均值的GSNO做外源性NO供应信息，以诱发caspase-3的身体S-亚硝基化。的结果体现了，与都没有GSNO的组相信，100、200和400μM GSNO组的caspase-3可溶性可观拉低（图1），与之前媒体报道不同。GSNO外理拉低caspase-3可溶性的隐藏的其原因仍欠缺阐发。

图1 各种不同氨水浓度的GSNO操作对caspase-3特异性的应响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的情况

探求Caspase-3的亚硝基化地步，以展现GSNO对Caspase-3的体现性。经GSNO办理后，判断到caspase-3核蛋白S-亚硝基化密度多（图2）。一些报告认为，外源性GSNO培养教育可成功创业引发caspase-3的身体之外S-亚硝基化。真令人惊叹的是，在没得GSNO出现的较组中判断到的不大的S-亚硝基化带，这认为caspase-3应该发生的内源性的S-亚硝基化。不仅，本探求中caspase-3的S-亚硝基化地步较高，而caspase-3的抗逆性缩减，这与已经的探求一致性。当然，caspase-3的特女性朋友S-亚硝基化淡化位点尚不很明白，还必须进两步的探求。

图2 GSNO治疗对caspase-3S-亚硝基化的水平的关系

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化绘制组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。红图标的队列透露S-亚硝基化肽，红图标的C透露S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3分解结蛋清

结核蛋清做其中一种重点的生殖细胞核骨架核蛋清，在能维持肌生殖细胞核架构的架构完正性和伸缩性这方面起关键点的作用，论述S-亚硝基化caspase-3对结核蛋清可化学降解的敏锐性还更具重点重大意义。与Std（未用胱天核蛋清酶-3和GSNO孵育的原始肌弹性钎维核蛋清）组比起来，0 μM GSNO组（肌原弹性钎维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完正结核蛋清分子量差异性较低，警告caspase-3对结核蛋清还更具自身的核蛋清电离效果。在GSNO孵育后，完正结核蛋清的分子量比较明显增长（P < 0.05）。虽然，当GSNO浓度值上升时，完正结核蛋清的分子量延续上涨（P < 0.05）（图5）。此挖掘证明，SNO体现的caspase-3以级别依靠的策略阻止结核蛋清的可化学降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3分解结蛋白酶

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3挥发肌钙核蛋白-T

肌钙核蛋清-T (TnT)是原肌球核蛋清调低有担当肌收拢的丝条的一定肌原玻纤材料核蛋清。TnT的吸附塑料特点是判断到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化具体条件下，caspase-3对TnT的吸附塑料情况发生就像文中6表达，与Std组（不包含caspase-3和GSNO的肌原玻纤材料）不同之处，caspase-3组中30 kDa TnT精彩情节为同质性曾加，找到caspase-3陆续参与了TnT的吸附塑料，还有，caspase-3与GSNO的孵育形成30 kDa TnT的减轻了。在100和200 μM GSNO组范围内不会有判断到突出的不一致性(P > 0.05)，而当GSNO的含量达到了400 μM 时，该精彩情节为同质性减轻了(P < 0.05)。以上找到找到了SNO绘制的caspase-3对TnT吸附塑料的仰制作而成用。结核蛋清和TnT是caspase-3的敏感性底物，而GSNO治理减轻了caspase-3的可溶性能够 形成肌原玻纤材料核蛋清吸附塑料阶段减轻了。结合以上说明，NO诱导性的S-亚硝基化能够 能够 绘制半胱氨酸残基来调低caspase-3的可溶性，继而进一点不良决定其对结核蛋清和TnT的核蛋清蛋白质水解作用，最后不良决定牛羊肉品性。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本科研致力于浅谈S-亚硝基化对caspase-3体现的作用举例说明陆陆续续对鸡肉肌原合成仟维身体光降解的作用。球蛋白质质S-亚硝基化可体现caspase-3的半胱氨酸残基，然后会造成caspase-3活性氧降底，进一点调控了其对鸡肉肌原合成仟维球蛋白质质的球蛋白质质蛋白质水解的能力。

三、拜谱个人心得体会

研发选择了酶活法测定，亚硝基化掩盖组学分折，WB等测量科技手段，出现球蛋清S-亚硝基化不错掩盖caspase-3的半胱氨酸残基，这引发了caspase-3化学活化的降低，齐头并进那步调整了其对鸡肉肌原纤维棉球蛋清的球蛋清电离程度。本研发为释疑球蛋清质亚硝基化对吃起来的调整机能出示一堆个新的角度 。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球胆固醇组学、淡化球胆固醇组学、代谢转化组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸题材成品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total钝化还原系统、解离巯基，欢迎大家咨询！

分类论文论文参考文献：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663